血清中メチルキサンチン（カフェイン，テオブロミン，テオフィリン）の分析
HPLC法による血清中メチルキサンチン分析法
標準液
カフェイン 100 mg，テオブロミン 50 mgあるいはテオフィリン 100 mgを100 mlメスフラスコにとり，35%メタノールで溶解して標準原液とする．標準原液を35%メタノールで希釈・混合し，それぞれを100 mg/L 含む混合標準液を作製する．これを適宜35%メタノールで希釈して用いる．
抽出
Sep-PaK C18（オリジナル）カートリッジ（充填剤量はSep-PaK C18 plus と同じ）を，あらかじめメタノール10ml，蒸留水10mlで洗浄．
血清0.5 mlに0.1％リン酸を加えて5 mlとし，撹拌後Sep-PaKカートリッジに負荷．
カートリッジを蒸留水10mlで洗浄した後，35％メタノール5 mlで溶出する．
溶出液をHPLC用試料とする．
HPLC条件
カラム：オクタデシルシリル化シリカゲルカラム（Inertsil ODS-2（4.6 mm x 150 mm））
移動相：0.05％酢酸−メタノール（4+1）
流速：1 ml/min.
カラム温度：40℃
検出：273 nmにおける吸光度
試料注入量：50μl
文献
（田中ら（1999）奈良県衛生研究所年報，第34号，68-70）
（茶がら給与牛のカフェイン中毒を疑う事例）
分析法は，使用カラム以外上記文献情報どおり．
使用カラム：COSMOSIL 5C18-MS-II (4.6×150mm), ガードカラムCOSMOSIL 5C18-MS-II (4.6×10mm)
（最終更新：2006.9.11）
