穀類のデオキシニバレノール,ニバレノール同時分析法
(飼料分析基準法,HPLC)
標準液
デオキシニバレノールあるいはニバレノール1 mgを5 ml褐色メスフラスコにとり,アセトニトリルで溶解し,標準原液とする(0.2 mg/ml).標準原液を一定量ずつ混合した後アセトニトリルで希釈し,デオキシニバレノール,ニバレノールそれぞれが25μl/mlの混合標準液を作製する.混合標準液を水−メタノール−アセトニトリル(18+1+1)で希釈し,分析用混合標準液とする.
抽出
試料25 gを200 mlの褐色共栓三角フラスコにとり,アセトニトリル−水(21+4)100 mlを加え,30分間振り混ぜる.
抽出液の一部を10 mlの褐色共栓試験管にとり,遠心上清を回収.
遠心上清8 mlを多機能クリーンナップカラム(Mycosep #227,昭和電工)の試験管に移す.
はじめの流出液が2 mlになるまで多機能クリーンナップカラムを押し込み,流出液を捨てる.
さらにカラムを押し込み,流出液2 mlをナスフラスコに回収.
減圧乾固した後,残留物を1 mlの水−メタノール−アセトニトリル(18+1+1)で溶解.
溶解液を1.5 mlプラスチック試験管にとり,10000 g,5分間遠心.
上清をHPLC.
HPLC条件
カラム:オクタデシルシリル化シリカゲルカラム(エンドキャッピングされたもの.例:Shodexシリカ C18M 4E(4.6 mm x 250 mm)
溶離液:水−メタノール−アセトニトリル(18+1+1)
流速:1 ml/min.
カラム温度:40℃
検出:紫外吸収(220 nm)
文献
飼料分析法・解説-2004-(日本科学飼料協会)
(最終更新:2005.1.13)