デオキシニバレノール分析法

市販ELISAキットによる飼料中マイコトキシンの分析

食品（主に穀物）中のマイコトキシンを簡便に分析するためのELISAキットが市販されている．

これらのキットは，飼料中のマイコトキシンを検査する場合にも応用可能な場合がある．

しかし，これらのキットの測定対象は主に穀物であるから，飼料に適用する場合は注意が必要である．

特にサイレージの場合は，抽出液中の有機酸が分析を妨害する．また，グラスサイレイージの場合は，抽出液を中和しても分析が妨害されると報告されている（1）．

マイコトキシン用ELISAキットは競合法であるので，抗原抗体反応を妨害する物質が存在すると，測定値が高く出る（マイコトキシンが存在しなくても陽性になる）ので注意が必要である．

FAMICの平岡らは，市販の多機能カートリッジカラムを応用し，サイレージ抽出液中の偽陽性原因物質を除去する方法を開発した（2）．

以上のように，市販マイコトキシン分析用ELISAキットは，場合によっては飼料の分析にも応用できるが，もし陽性の結果が出た場合は，機器分析による確認が必要である．

市販マイコトキシンキットの情報は下記から得られる（50音順）．

アヅマックス株式会社

エアブラウン株式会社

昭和電工

文献

1．平岡ら，2006．第５９回マイコトキシン研究会学術講演会講演要旨集，p17-18．

2．平岡，2007．れとると，No.28, 15-31.

ELISAキットによるサイレージ中デオキシニバレノール分析法
（FAMIC平岡らが開発した，多機能カートリッジカラムによる試料前処理法）

多機能カートリッジカラム：Multisep#226 AflaZon+ （Rormer Labs.製，昭和電工扱い）．
試料の前処理：サイレージは風乾あるいは60℃で乾燥後に粉砕し，冷蔵保存する．
抽出：ELISAキットの説明書に従い抽出・ろ過する．
- 市販のデオキシニバレノール分析用ELISAキットでは，水抽出を行っている．
- 振とう抽出後，抽出液をろ紙でろ過する．
- キットによっては，ろ過後に水で希釈．
多機能カートリッジカラムによる精製：キットの説明書に従って調製した抽出液を，多機能カートリッジカラムで精製する．
- 抽出液を多機能カートリッジカラムのリーザーバー部分に入れる．
- 二連球等を用いて加圧し，抽出液をカラムへ浸透させる．
- 抽出液を自然流下させる．流速が遅い場合は二連球等で加圧する．流速は1 mL/min以下とする．
- カラムを通過したはじめの流出液4 mLを捨て，その後の1 mLを回収し，よく混合したものをELISA用試料とする．
ELISA分析：多機能カラムで精製した試料を，キット説明書に従って分析する．
（注）ここで用いる多機能カートリッジカラム（Multisep#226 AflaZon+ ）は本来アフラトキシンおよびゼアラレノン分析用であるが，水抽出液ではデオキシニバレノールはこのカラムを通過し，妨害物質が吸着される．


多機能カートリッジカラムに抽出液を流し，流出液を回収: 　

多機能カートリッジカラムの内径にフィットしたゴム栓を二連球につける．
これを多機能カートリッジカラムの上部につなぎ，加圧して流速を調整する．

（最終更新：2008.8.13）

農業・食品産業技術総合研究機構　動物衛生研究所　安全性研究チーム