飼料中のゼアラレノンとステリグマトシスチンの分析
(飼料分析基準法,HPLC)
標準液
ゼアラレノンあるいはステリグマトシスチン1 mgを5 ml褐色メスフラスコにとり,アセトニトリルで溶解し,標準原液とする(0.2 mg/ml).標準原液をアセトニトリル−水(21+4)で希釈し,分析用標準液とする.
抽出
試料25 gを200 mlの褐色共栓三角フラスコにとり,アセトニトリル−水(21+4)100 mlを加え,30分間振り混ぜる.
抽出液の一部を褐色共栓試験管にとり,遠心上清を回収.
遠心上清9 mlを多機能クリーンナップカラム(Mycosep #226,昭和電工)の試験管に移す.
はじめの流出液が4 mlになるまで多機能クリーンナップカラムを押し込み,流出液を捨てる.
さらに,流出液が2 mlになるまでカラムを押し込み,流出液を均一化.
流出液の一部を1.5 mlプラスチック試験管にとり,10000 g,5分間遠心.
上清をHPLCへ.
HPLC条件
カラム:オクタデシルシリル化シリカゲルカラム(エンドキャッピングされたもの.例:Mighsil RP-18 GP(4.6 mm x 250 mm)
溶離液:メタノール−水(13+7)
流速:1 ml/min.
カラム温度:40℃
検出:ゼアラレノン−蛍光(励起 278 nm,蛍光 460 nm).
ステリグマトシスチン−紫外吸収(330 nm)
文献
飼料分析法・解説-2004-(日本科学飼料協会)
(最終更新:2005.1.12)