ヘキサクロロベンゼン(HCB)を好気的に分解・無機化する細菌の単離・同定と主要代謝経路の解明：（農業環境技術研究所）

［要約］: ペンタクロロニトロベンゼン(PCNB)を炭素・窒素源とした土壌・木炭還流法により単離した細菌PD653株はPOPs（残留性有機汚染物質）であるHCBを好気的にPCP(ペンタクロロフェノール)に変換し、さらに脱塩素分解・無機化できます。Nocardioides属に属する新種で、世界で唯一のHCB資化性菌です。

［背景と目的］: ヘキサクロロベンゼン（HCB）はPOPs条約（2001年5月に採択された国際条約）の対象物質ですが、これを好気的に分解・無機化出来る微生物は報告されていません。そのため、環境中に長期間残留しているHCBのバイオレメディエーション（環境修復）技術の開発が進んでいません。農業環境技術研究所では、これまでに我々が開発した土壌・木炭還流法を用いてHCBの類似化合物であるPCNBを分解する細菌PD653株を単離することに成功しています。そこで、単離した菌株を同定し、HCBを好気的に脱塩素分解・無機化出来るか検討しました。さらに、その主要代謝経路を明らかにしました。

［成果の内容］: 　PCNBを好気的に脱塩素分解する細菌PD653株を発見しました。本菌は16S rRNA遺伝子の塩基配列を基づく系統樹の位置からグラム陽性のNocardioides属に属する新種であることが明らかになりました（図１）。¹⁴Cで標識したHCBを唯一の炭素源とした無機塩培地を用いてPD653株を培養するとHCB濃度が減少し、¹⁴CO2が生成しました（図２左）。また、PD653株はHCBを唯一の炭素源とした培地中で増殖し、Cl^-濃度の増加が確認されました（図２右）。これらの結果から、PD653株はHCBを好気的に脱塩素分解し、無機化することが明らかになりました。PD653株を用いてHCBの好気的代謝試験を行ったところ、HCBは速やかに脱塩素化され、初発代謝物としてPCPが産生され、さらに、代謝物としてTetracholohydroquinone (TeCH)、2,6-Dicholohydroquinone(DiCH)が検出されました（図３）。
　このように、Nocardioides sp.PD653株は、HCBを好気的に分解・無機化できる細菌として世界で始めて単離・同定された菌株（野生株）であり、HCB汚染土壌のバイオレメディエーションへの適用に大変有望な菌株として期待されています。

リサーチプロジェクト名：有機化学物質リサーチプロジェクト
研究担当者：有機化学物質研究領域 高木和広、亀井一郎（現：福岡大）、岩崎昭夫（興和総研）、吉岡祐一（東洋電化工業）、薩摩孝次（残留農薬研究所）
発表論文等： 1) 高木、吉岡、特許第3030370 号（2000）
              2) 高木、吉岡、特許第3773449 号（2006）
              3) 高木ら、特願2005-189986 号（2005）
              4) Takagi et al., Appl. Environ. Microbiol., 75(13), (2009)

主要研究成果 ２

ヘキサクロロベンゼン(HCB)を好気的に分解・無機化する細菌の単離・同定と主要代謝経路の解明

主要研究成果　２