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植物のフルクタン代謝酵素及びインベルターゼのアミノ酸配列に高度に保存されている領域を利用して、ハードニングしたフルクタン高度蓄積性の秋播コムギPI
173438クラウン組織からオオムギのsucrose:fructan 6-fructosyltransferase (6-SFT)と約93％の相同性を持つcDNA（Wft1）及びトールフェスクのsucrose:sucrose
1-fructosyltransferase (1-SST)と約73％の相同性を持つcDNA(Wft2)を単離した。 |
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単離した２種類のcDNAをメタノール資化性酵母(Pichia pastoris)に組み込み発現させ、Wft1、Wft2がコードするタンパクの酵素学的性質の解析を行った。Wft1由来のタンパクは、スクロース(２糖）を基質として１-ケストース(３糖）、６-ケストース（３糖）、スクロースと１-ケストースを基質として、１＆６-ケストテトラオース（４糖）を主に合成する活性を持つことから6-SFTである。Wft2由来のタンパクは、スクロースを基質として１-ケストースを合成する一方、１-ケストースを基質として４糖を合成する活性が低いことから、1-SSTである（図１）。 |
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５品種の秋播コムギ、フルクタン蓄積量が極めて多いPI 173438及び農林６２号、フルクタン蓄積量が前述の２品種より少ないValuevskaya、Norster及びチホクコムギにおける秋から初冬にかけてのハードニング中の両遺伝子の発現量の解析を行った。両遺伝子ともに、葉及びクラウン組織でハードニング誘導性が確認され、かつフルクタン蓄積量の多いコムギ（PI
173438,農林６２号）で特に発現量が多い。このことから、単離されたWft1,Wft2はともに越冬のためのフルクタン蓄積に関与する遺伝子である（図２）。 |
