ペレニアルライグラスとメドウフェスクを識別するDNAマーカー

［要約］

ペレニアルライグラスとメドウフェスクを識別する143のDNAマーカーを開発し、うち107について両種における座乗染色体を決定した。これらのDNAマーカーには両種に対し高い識別能を示すものが含まれる。

［キーワード］

フェストロリウム、ライグラス、フェスク、DNAマーカー、イネゲノム

［担当］北海道農研・寒地飼料作物育種研究チーム
［代表連絡先］電話011-857-9260、電子メールseika-narch@naro.affrc.go.jp
［区分］北海道農業・畜産草地、畜産草地
［分類］研究・普及

［背景・ねらい］

   再生と飼料品質に優れるライグラス類 (Lolium属)と越冬性等の環境ストレス耐性に優れるフェスク類(Festuca属)との属間雑種であるフェストロリウムは、北海道においては、土壌凍結地帯でも栽培可能な、放牧適性に優れる草種として期待が高い。フェストロリウムの育種を行う上で育種素材のゲノム構成が明らかになれば、表現型からだけではできない、ゲノム構成に着目した材料の選抜が可能となる。また両属に由来する有用形質に連鎖するDNAマーカーが開発できれば選抜の高精度化・効率化が期待できる。これらを行うためにはゲノム全体をカバーする両属の識別DNAマーカーを開発する必要がある。イネ科牧草はゲノム配列などの研究資源に乏しく、効率的なDNAマーカーの開発には近縁のイネのゲノム情報の活用が有効である。そこでイネゲノム情報を利用して両属を代表する種であるペレニアルライグラス(PR)とメドウフェスク(MF)の識別DNAマーカーを開発する。

［成果の内容・特徴］

1. イネのゲノム情報を利用してプライマーを設計し、PCR産物がPRとMF間で多型を示すものをマーカーとする（図１）。
2. ゲノム全体に散在するように開発されたPRとMF間で多型を示す計143の識別DNAマーカーの内訳は、電気泳動のみで多型を示すInsertion-deletion (Indel)型マーカーが61、制限酵素処理後に電気泳動して初めて多型を示すCleaved Amplified Polymorphic Sequences (CAPS)マーカーが82である。このうち107のPR/MF識別DNAマーカーのPR・MFにおける座乗染色体が決定されている（表１）。
3. Indel型マーカーについてPRおよびMF各４品種・系統計64個体で試験した結果、図２a のように両種を完全に識別するものは61マーカー中15マーカーである。またCAPSマーカーについてバルクレベル（同じ品種・系統に由来する８個体のゲノムDNAを混合した状態）で図２b のように両種を完全に識別するものは82マーカー中49マーカーである。

［成果の活用面・留意点］

1. 属間雑種のゲノム構成の解明や移入染色体領域の推定などに利用できる。
2. プライマー配列などの各マーカーの情報は論文の掲載webページより入手できる(http://www.springerlink.com/content/n55l4n396437wvm8/122_2009_Article_1003_ESM.htm)。
3. 本成果の識別DNAマーカーはPRとMFを識別する目的で開発されており、イタリアンライグラスやトールフェスクなどの他種の解析は今後の検討を要する。

［具体的データ］

［その他］

研究課題名：大規模草地・飼料畑の活用のための高TDN飼料作物品種の育成
中課題整理番号：212c.2
予算区分：基盤、委託プロ（DNAマーカー）
研究期間：2004?2009年度
研究担当者：田村健一、米丸淳一、金森裕之（STAFF研）、田瀬和浩、眞田康治、小松敏憲、山田敏彦
発表論文等：Tamura et al. (2009) Theor Appl Genet 118(8): 1549-1560