BSE 診断における磁性粒子BL 法の検証

［要約］

磁性粒子BL 法は、BSE プリオン感染牛を用いた検証により、発症前のPrPSc 蓄積初期段階でもPrPSc を検出でき、BSE 診断に有効である。

［キーワード］

家畜、ウシ、衛生、BSE、プリオン

［担当］道立畜試・基盤研究部・遺伝子工学科、感染予防科、病態生理科、受精卵移植科、動物衛生研・プリオン病研究センター、北海道大学大学院・プリオン病学講座、帯広畜産大学・家畜病理学教室、岐阜大学・食品環境衛生学教室、栄研化学
［代表連絡先］電話0156-64-5321
［区分］北海道農業・畜産草地
［分類］研究・参考

［背景・ねらい］

   牛海綿状脳症（BSE）において生前診断は今なお困難である。安全で安心できる北海道産畜産物の供給とBSEの早期清浄化を図るため、これまでに開発した磁性粒子BL法の実用性の検証を行う。

［成果の内容・特徴］

1. 磁性粒子BL法は、道内BSE患畜５頭（21例目：視床、22例目：線条体、26例目：視床、27例目：大脳髄質、29例目：視床）の脳５mg組織等量からPrPScを検出でき（図１）、特に脳幹部に隣接する視床で高い値を示す。
2. 国内BSE患畜５頭の脳を用いた磁性粒子BL法とELISA法の比較では、従来法のELISA法のOD値に対して磁性粒子BL法は高い相関（R2 = 0.9537）がある（図２）
3. 磁性粒子BL法は、蓄積初期段階の状態である脳内接種後12ヶ月のBSEプリオン感染牛をはじめ、解析したBSEプリオン感染牛17頭（道内BSE患畜５頭、脳内接種12頭）すべてからPrPScの検出が可能であり（図３）、BSE診断に有効である。
4. BSEプリオン感染脳を試料として超音波処理を行い、その反応産物中のPrPSc検出を磁性粒子BL法により行うと、処理前に比べ高い反応を示し、超音波処理と磁性粒子BL法の組合せが良好である。

［成果の活用面・留意点］

1. 本課題の成果は、BSEの生前診断および発症機序の解明のための研究に用いる。

［具体的データ］

［その他］

研究課題名：高感度プリオン検出技術に基づく新しいBSE早期診断システムの開発 予算区分：道費（重点領域） 研究期間：2006〜2008年度 研究担当者：福田茂夫、甲田洋子、澤井健、陰山聡一、森安悟、尾上貞雄、藤井啓、二階堂聡、仙名和浩、伊藤めぐみ、桜井由絵、松井義隆、川本哲、草刈直仁