［要約］: 高温処理に対して牛末梢血リンパ球で発現する熱ショックタンパク質(HSP)はノニルフェノールにより発現が抑制される。また、その発現抑制反応は温度に依存し、還元型グルタチオンおよびアスコビン酸添加で緩和される。
［キーワード］: 家畜生理・栄養、乳牛、耐暑性、熱ショックタンパク質
［担当］: 九州沖縄農研・畜産飼料作研究部・環境生理研究室


［連絡先］電話096-242-7748	
［区分］九州沖縄農業・畜産草地（乳牛）	
［分類］科学・参考

［背景・ねらい］: 内分泌かく乱物質の一つとして知られているp-n-ノニルフェノール（NP）の生体に対する作用については、魚類等に対するメス化作用以外はほとんど解っていない。しかし、その化学物質としての人を含めた高等動物に対する影響解明が強く求められている。そこで、細胞・個体の耐熱性因子であるHSP発現に及ぼすNPの影響に着目し、牛個体から回収したリンパ球画分に各種濃度のNPを作用させ、HSP発現に及ぼす影響を検討し、その作用を緩和する生体成分の検索を行う。

［成果の内容・特徴］

乳牛の頸静脈から採取したヘパリン血より比重遠心法で回収したリンパ球画分に各種濃度のNPを作用させ、摂氏43度、30分の高温処理を行い、その後熱ショックにともない特異的に合成されてくるHSP（HSP72、HSP27）と無処理区のHSPをウェンタンブロットで検出し、両者の比をHSP発現誘導比とする（図1）。
高温処理によって発現するHSP72はNPで抑制され、その発現抑制率は図2に示すようにNP濃度の増加によって上昇する。
HSP72およびHSP27発現抑制のNPに対する感受性を表すKm値は、反応温度の影響を受け、反応温度が摂氏38度の時よりも摂氏43度で顕著に小さくなる（表1）。これは、同じ濃度のNPであっても環境温度が高い場合に、より低濃度で強い影響がでることを示唆している。
HSP72のNPによる発現抑制は、還元型生体成分である還元型グルタチオンおよびアスコルビン酸の添加で緩和される（図3）。
以上から、生体中に高濃度に蓄積したNPはHSPの発現を抑制することで生体の高温適応性を障害する可能性が示唆されるが、その作用は還元型生体成分の投与によって緩和される可能性がある。

［成果の活用面・留意点］

［具体的データ］

図1　乳牛末梢血リンパ球画分のHSP発現誘導比に及ぼすノニルフェノールの影響評価

表1　ノニルフェノール感受性における温度の影響

図2　HSP72の発現抑制に及ぼすノニルフェノールの影響

図3　NPのHSP72発現抑制効果に及ぼすアスコルビン酸（AA)と還元型グルタチオン（GSH)の効果

［その他］

研究課題名：乳牛の高温環境下における熱ショックタンパク質合成反応に対する内分泌かく乱物質の作用機構の解明
課題ID：07-04-05-*-03-02
予算区分　：環境ホルモン
研究期間　：1999～2002年度




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