［要約］: 細胞間隙分泌型に改変した溶菌酵素遺伝子のβ-1,3グルカナーゼとキチナーゼ遺伝子を連結したバイナリーベクターによって植物を形質転換することにより、細胞間隙における両遺伝子の発現が可能で、抗菌活性を高める。
［キーワード］: グルカナーゼ、キチナーゼ、バイナリーベクター、抗菌活性
［担当］: 福岡農総試・生産環境研・生物資源部・生物工学研究室


［連絡先］電話092-924-2970	
［区分］九州沖縄農業・植物バイテク	
［分類］科学・参考

［背景・ねらい］: 植物のキチナーゼは、傷害や病原菌の感染によって誘導され、糸状菌の胞子発芽や菌糸伸長を阻害することから、生体防御酵素であると考えられている。しかし、キチナーゼ遺伝子単独での導入では、抗菌スペクトルが狭いと考えられている。そこで、キチナーゼに加えてグルカナーゼ遺伝子を協調的に発現させることにより、抗菌スペクトルを広げて耐病性機能の強化を図る。

［成果の内容・特徴］

タバコのβ-1,3グルカナーゼ遺伝子を細胞間隙分泌型に改変し、ヤマイモキチナーゼ遺伝子との同時発現用バイナリーベクターを構築した（図1）。
形質転換植物における細胞間隙分泌型ヤマイモキチナーゼおよびタバコグルカナーゼ遺伝子の発現は、Tissue Electro Blot Immuno-Assay（図2）やウエスタンブロット法により確認できる。
両遺伝子が同時発現する形質転換タバコでは単独発現に比べて、細胞間隙抽出液での病原菌の菌糸伸長阻害活性が高い（表1）。

［成果の活用面・留意点］

［具体的データ］

図1　細胞間隙分泌型グルカナーゼとキチナーゼ遺伝子の導入による抗菌活性の強化

図2　Tissue Electro Blot Immuno-Assayによる細胞間隙分泌型ヤマイモキチナーゼの検出（左：装置の構成、右：検出像）

表1　形質転換タバコ細胞間隙抽出液における病原菌菌糸伸長

［その他］

研究課題名：導入遺伝子の機能強化技術の確立
予算区分　：県単
研究期間　：1997～2001年度