［要約］: 数が多く、サイズが小さいサトウキビ属植物の染色体を、精度良く観察する方法を開発した。根端組織を酵素解離し、プレパラート上で蒸気を当てた後に温熱乾燥処理することで、良好な染色体観察標本を作製することができる。
［キーワード］: サトウキビ、染色体、高次倍数性、種間交雑
［担当］: 九州沖縄農研・作物機能開発部・さとうきび育種研究室


［連絡先］電話0997-25-0100	
［区分］九州沖縄農業・畑作	
［分類］科学・参考

［背景・ねらい］: サトウキビ属植物は高次倍数性で染色体数が多く、製糖用品種の染色体数は2n=100-130である。染色体のサイズも小さいことから、明瞭な染色体像を得るためには熟練した技術と経験が必要である。種間交雑や倍数性の高い作物の育種では、染色体数やゲノムの構成を正確に把握する必要があるが、サトウキビにおいては染色体観察が容易でないことから、染色体情報は育種の現場で活用されることが少なかった。そこで、育種の現場での活用が容易で良好な染色体標本を、安定的に得るための効率的な方法を開発する。

［成果の内容・特徴］

サトウキビの種苗を水で湿らせた紙に包み、室内で発根させ、2～3cmに伸びた根を用いる。根端は冷水処理により前中期染色体を蓄積させ、固定した後、保存する（図1）。
酵素解離した根端をスライドガラスに移し、固定液Bを滴下し、ピンセットで細かく潰す。固定液が乾燥を開始したときに、スライドガラスの試料側に蒸気をあて、アルミブロック恒温槽で急速に乾燥させると、染色体観察のための良好な標本ができる（図1）。
酵素液の組成は2%w/v Cellulase Onozuka RS,1% w/v Macerozyme R200,0.3%w/vPectolyase Y-23,10mM citrate buffer,pH4.8が適している。
この処理により染色体同士の重なりが少なくなり、明瞭に区別できる標本が安定して得られる。染色体標本の直径は従来の風乾法と比較して、約10%拡がる。（図2、表1）。
従来法は室温や湿度条件に影響されやすく、観察に適した標本の作製には熟練を要したが、本法によって比較的容易に標本が作製できるようになる。

［成果の活用面・留意点］

［具体的データ］

図1　温熱乾燥処理の概要

図2　風乾法と温熱乾燥処理により作成した染色体標本

表1　風乾法と温熱乾燥処理により作成した染色体標本の直径の差異

［その他］

研究課題名：新たな機能開発のためのサトウキビ遺伝資源の収集・保存と生育特性の解明
課題ID：07-07-02-02-14-04
予算区分　：交付金、ジーンバンク
研究期間　：2001～2004年度